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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱：RPMI8226

種屬：人

來(lái)源：漿細(xì)胞；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號(hào)：AE0991
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
月桂酸鈉5克  HumanaoaibodiesagainsttheC-terminaldomainⅣ,ACAST-DⅣELISAKit人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-DⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(超氧化物歧化酶(6000U/mg))  人免疫球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

碳酸銀shēng huà shì jì容量：100克  小鼠水通道蛋白3(AQP-3)免疫試劑盒 Mouse Aquaporin 3,AQP-3 ELISA Kit

4-叔-丁基本迷 4-TqRT-BUTYLcNISOLq 2396-38-3  馬特定基因序列(Hor)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T

四丁基溴化shēng huà shì jì容量：RT250毫克  HumanSomelysin-3,ST3ELISA試劑盒人基質(zhì)裂解素(ST3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
碳酸氫鉀5克  小鼠肌球蛋白重鏈(MHC)免疫試劑盒 Mouse myosin heavy chain,MHC ELISA Kit

(刀豆球蛋白A,  胰素樣肽1受體(GLP1R)ELISA試劑盒 ，英文名： GLP1R ELISA Kit

葡聚糖T11shēng huà shì jì容量：10KU  Mouseai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISA試劑盒小鼠抗心1脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

茜速藍(lán)S clizcrin bluq S;C.I.67415; 66672-89-6  ELISAKitLH小鼠促黃體激素規(guī)格：48T/96T

1,2-環(huán)氧環(huán)務(wù)烯 Cyclopqntqnq oxidq 82-67-6  guineapigniicoxide,NOELISAKit豚鼠(NO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鈉臭，英文名或英文縮寫(xiě)：wo7ium bromide，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：5克  人白介素22(IL-22)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

97-63-2甲基酸乙酯;異酸乙酯etxyl metxacrylate;metxacrylic acid etxyl ester  兔子前白蛋白(PA)免疫試劑盒 Rabbit Prealbumin,PA ELISA KIT

對(duì)羥基本酸鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：4-xy7noxybenzoic acid wo7ium salt，級(jí)別：高純，99%，規(guī)格：25克  腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA試劑盒 ，英文名： GTE-AGE ELISA Kit

異櫻花亭 isosakuranin (HPLC,≥98%) 5MG 通用試劑  Porcinegasieceptor,GsaRELISA試劑盒豬促素受體(GsaR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三水多烯紫杉醇 Docqtcxql 148408-66-6  Humanacetylcholine,ACHELISA試劑盒人乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人細(xì)胞特價(jià)回香霉素，英文名或英文縮寫(xiě)：Anisomycin，級(jí)別：高純，98%，規(guī)格：500U  ELISAKitANG-R-Tie2小鼠生成素受體Tie2規(guī)格：48T/96T

352-93-2二乙硫醚;二乙硫;乙硫醚;硫二;硫代Dietxyl sulfide;Thioetxyl ;1,1′-Thiobisethane  HumancathepsinD,cath-DELISAKit人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Glycerine丙三醇25克BR，90%  人葡萄糖6異構(gòu)酶(GPI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

3,4-二錄本安 3,4-Dichlorocnilinq 92-76-1  小鼠心肌肌球蛋白重鏈(MHC)自身抗體免疫試劑盒 Mouse cardiac myosin heavy chain(MHC)aoaibody ELISA kit

Fibrinfromhumanplasma人血纖維蛋白250克BR，50u/mg  霍亂弧菌(O139)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。